Polimeraz zanjir reaktsiyasi va uning tabiati va ko'lami

Polimeraz zanjir reaktsiyasi (PCR) - biologik material kichik miqdorda aniqlash imkonini beradi molekulyar biologiya, bir usul deoksiribonükleik kislota (DNK), yoki aksincha, uning parchalari ba'zi, ularni ko'paytirib ko'p marta. Bas, ular gel elektroforez tomonidan ingl aniqlandi. reaktsiya K. Mullis tomonidan 1983 yilda ishlab chiqilgan va so'nggi yillar tengsiz kashfiyotlari ro'yxatiga kiritilgan edi.

mexanizmlari, PCR nima

butun tartibi, bu holda laboratoriyada sun'iy bo'lib, bu o'z-o'zini replikatsiya qilish uchun nuklein kislotalarning qobiliyati, asoslangan. boshlang'ich bo'lak - DNK ko'payish, lekin faqat nukleotidlarning muayyan ketma-ketlikda bilan joylarda, molekulada har qanday mintaqada etolmayman. polimeraz zanjir reaktsiyasi uchun boshlandi, biz primer (yoki DNK datchiklari) kerak bo'ladi. Bu berilgan nükleotid bilan DNK-ketliklar qisqa bo'laklari bo'ladi. Ular bir-birini to'ldiruvchi (masalan, mos) namuna DNK qismlarini start bo'ladi.

Albatta, astarlar yaratish, olimlar nükleotitlerinin ketma-ketlikni o'rganish kerak nuklein kislota, tartibda ishtirok etadi. Bu DNK zondlar reaktsiya va uning qo'zg'atish xususiyatlari ta'minlash. Polimeraz zanjir reaktsiyasi namuna kerakli DNK kamida bitta molekulasi topish qilmasa, bormayman. Umuman, reaksiya yuqorida primerleri, nukleotidlarning majmuini, issiqlik chidamli DNK polimeraza talab qiladi. bir namuna asosida yangi nuklein kislota molekulalarining sintez katalitik reaktsiyalar - ikkinchisi fermentdir. DNKni aniqlash uchun zarur bo'lgan biologik masala, shu jumladan, bu moddalar, barcha bir reaktsiya aralashmasi (eritma) birlashtirildi. davr - Bu uning juda tez isitish va belgilangan vaqt ichida sovutish bajaradi maxsus termostatda joylashtirilgan. Ular, odatda, 30-50 bo'ladi.

Bu qanday reaksiya hisoblanadi

Bu mohiyati bir davr davomida, primerler u ferment tomonidan takrorlash ketadi, shundan keyin kerakli DNK, bo'limlari biriktirilgan, deb hisoblanadi. keyingi ko'chadan yana va bir xil molekulalarning ko'proq bo'laklar sintez natijasida DNK asosida.

Polimeraz zanjir reaktsiyasi izchil uning qadamlar quyidagi qutqazilmas. Bu birinchi isitish va sovutish har tsikli davomida mahsulot miqdorini ikki barobarga bilan xarakterlanadi. fermenti shikastlangan va faoliyatini yo'qotadi, chunki reaktsiya ikkinchi bosqich esa pastlab sodir bo'ladi. Bundan tashqari, nukleotidlarning va astar zahiralari tugab. plato - - o'tgan bosqichda mahsulotlar endi hech bo'ladi ustidan reaktifler sifatida to'planadi.

Bu ishlatiladi qayerda

Shubhasiz, keng dastur polimeraz zanjir reaktsiyasi tibbiyot va ilm-fan topadi. Bu davlat va xususiy biologiya, veterinariya, dorixona, va hatto ekologiya ishlatiladi. ikkinchisi oziq-ovqat sifati va atrof-muhit ob'ektlarni nazorat qilish uchun qilyapsan-da. Faol odamning hisobga olish, otalik va identifikatsiya tasdiqlash uchun sud-amalda polimeraz zanjir reaktsiyasini ishlatiladi. Yilda sud-fan, bu DNK juda kichik miqdorda o'rganish uchun odatda mavjud, chunki, shuningdek paleontologiya bilan, ko'pincha, bu usul, yagona yo'lidir. Albatta, juda keng tarqalgan bo'lib foydalaniladigan usul tibbiyot amaliyotida topilgan. U yuqumli genetika va onkologik kasalliklar kabi sohalarda uni zarur.